Marcus Signer absolvierte 1982 bis 1986 eine Ausbildung als Schauspieler und Animator an der «Theaterwerkstatt 1230» in Bern, wo er anschliessend bis 1992 festes Ensemblemitglied wurde. Nach einem Stipendium-Aufenthalt in New York City arbeitete er als freier Schauspieler. Er spielte am Stadttheater Bern, beim «Club 111» und am «In Situ» Chur. Neben seiner Arbeit am Theater war Signer auch in Film- und Fernsehproduktionen zu sehen, wirkte in Hörspielen mit, arbeitete als Sprecher für Werbespots und trat regelmässig am Stadttheater Bern auf.
Für seine Rolle «Mischa» im Schweizer Low-Budget Erfolgsfilm Mary & Johnny gewann er für seine Darstellung den Berner Filmpreis 2012. Für die Hauptrolle in Der Goalie bin ig (Regie: Sabine Boss) nach dem gleichnamigen Roman von Pedro Lenz wurde er beim Schweizer Filmpreis 2014 als bester Darsteller ausgezeichnet.
2018 erhielt Marcus Signer für die SRF-Serie «Wilder» den Schweizer Fernsehfilmpreis. Er ist sowohl in Fernsehproduktionen regelmässig zu sehen – z.B. beim Zürcher Tatort – Blinder Fleck 2023 (Regie:Tobias Ineichen) – als auch in Kinofilmen – u.a Die Schwarze Spinne 2022 und Der Bestatter – Der Film 2023 (Regie: Markus Fischer)
Seit 2025 verkörpert Marcus den legendären Privatdetektiv Philip Maloney.